液滴数字PCR(Droplet DigitalPCR,ddPCR)技术是实现核酸分子绝对定量 的有效工具,其具有极高的灵敏度和特异性,在多个领域具有广泛应用。
当前半自动ddPCR系统存在操作繁琐、流程复杂、容易引发污染的局限性。

本文详细研究了样品进结果出的一体化ddPCR技术。为了确定适用于一体化ddPCR的微滴生成技术,我们首先从ddPCR中最重要的步骤(微滴生成)展开,分别对流动
聚焦微滴生成和超声波微滴喷射两种微滴生成技术进行研宄,对比两种技术对于ddPCR应用的灵活性和适用性,以确定最佳的微滴生成技术。
实验步骤:
在ddPCR分析中,样品(DNA混合溶液)作为分散相,由分散相入口进入,微滴生成油作为连续相,由两个连续相入口同时 进入,微滴生成后,包含DNA混合溶液的微
滴和生成油从流动聚焦结构的出口流出。本实验所用设备包括:光刻机,温箱,台式匀胶机,等离子清洗机等。


PDMS芯片的设计与制作

使用经典的软光刻工艺制作了本章中的PDMS芯片。软光刻技术,基于自组装和模板复制转移图案,用来制作微米和纳米级的微通道芯片。由于对材料消耗量和环境洁净
度的要求不高,软光刻技术在微流控芯片制作中应用程度很广。这种加工技术流程大致可以分为三个步骤:芯片模具的制作、PDMS芯片的浇注成型以及芯片的键合和后处理。

PLUTO-T等离子清洗机